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大鼠凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISA試劑盒操作步驟

更新時(shí)間:2026-05-26  |  點(diǎn)擊率:191

   大鼠凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISA試劑盒

   貨號(hào):BS-2877

   名稱(chēng):大鼠凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISA試劑盒

   規(guī)格:96T/48T

   基本信息:

   檢測(cè)原理?:主流采用?雙抗體夾心法?檢測(cè),預(yù)包被AIF特異性抗體,樣本中AIF結(jié)合后,再加入HRP標(biāo)記檢測(cè)抗體形成復(fù)合物,通過(guò)TMB顯色定量,產(chǎn)物顏色深淺與AIF濃度正相關(guān)。

   適用樣本?:大鼠血清、血漿、組織勻漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清、細(xì)胞裂解液。

   核心性能(通用標(biāo)準(zhǔn))?:檢測(cè)范圍通常為0.1ng/mL-8ng/mL,低檢測(cè)限≤0.05ng/mL;板內(nèi)變異系數(shù)CV<10%,板間CV<15%,特異性不與其他凋亡相關(guān)蛋白交叉反應(yīng)。

   操作步驟:

   實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備?:試劑盒從2-8℃取出,室溫平衡30分鐘;20×濃縮洗滌液按1:19比例用蒸餾水稀釋?zhuān)粌龈蓸?biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶后做倍比稀釋?zhuān)玫?-7個(gè)梯度濃度。

   加樣孵育?:設(shè)置空白、標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔加50μL對(duì)應(yīng)濃度標(biāo)準(zhǔn)品,待測(cè)樣本孔先加40μL稀釋液再加10μL樣本(稀釋倍數(shù)5倍),封板后37℃孵育60分鐘。

   洗滌加酶?:洗滌5次拍干后,除空白孔每孔加100μLHRP標(biāo)記檢測(cè)抗體,重新封板37℃孵育60分鐘,再次洗滌5次拍干。

   顯色讀數(shù)?:每孔依次加50μL顯色劑A、50μL顯色劑B,37℃避光顯色15分鐘,加50μL終止液終止,15分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀450nm波長(zhǎng)讀數(shù)。

   結(jié)果計(jì)算?:四參數(shù)擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),根據(jù)樣本OD值查出濃度后乘以稀釋倍數(shù),得到終AIF實(shí)際濃度。

   使用注意事項(xiàng):

   選型時(shí)優(yōu)先選擇?雙單抗配對(duì)?的試劑盒,特異性更好,能降低非特異性結(jié)合導(dǎo)致的背景偏高問(wèn)題;若檢測(cè)細(xì)胞樣本,需確認(rèn)產(chǎn)品標(biāo)注支持細(xì)胞裂解液檢測(cè)。

   大鼠組織樣本需要提前預(yù)處理:組織塊勻漿后離心取上清,去除碎片沉淀后再檢測(cè),避免堵孔或干擾顯色。

   實(shí)驗(yàn)必須設(shè)置復(fù)孔和陰陽(yáng)性對(duì)照,若標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)線(xiàn)性R2<0.98,需要排除標(biāo)準(zhǔn)品降解或操作誤差,重新實(shí)驗(yàn)。

   注:以上科研產(chǎn)品資料供參考!

   天津天正信達(dá)供應(yīng):RNA逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、PCR試劑盒、提取試劑盒、色譜進(jìn)樣瓶、培養(yǎng)基瓶、試劑瓶、胎牛血清、染色液、試劑瓶、QPCR試劑盒、生物試劑、抗體、瓊脂糖、實(shí)驗(yàn)耗材,我司擁有一支覆蓋生物化學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)等專(zhuān)業(yè)人員的研發(fā)、構(gòu)建了儀器設(shè)備齊全的實(shí)驗(yàn)技術(shù)平臺(tái),主要包括AKTA、高壓均質(zhì)機(jī)、全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀、高速落地離心機(jī)和qPCR儀等大型儀器設(shè)備。

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