標(biāo)簽：天津天正信達(dá)  ELISA試劑盒  96孔板 酶標(biāo)板 抗體

    天正信達(dá)闡述：ELISA試劑盒操作的洗滌方法

    ELISA試劑盒操作中，洗滌是去除未結(jié)合物質(zhì)、降低背景噪音的核心步驟，主流分為?手工洗滌和洗板機(jī)洗滌?兩種方法，具體操作規(guī)范和要點(diǎn)整理如下：

    一、通用準(zhǔn)備工作

    提前按說明書稀釋濃縮洗滌液，若濃縮液冷藏析出結(jié)晶，需37℃水浴加熱溶解后再稀釋，保證濃度準(zhǔn)確。

    洗滌前先棄去板內(nèi)反應(yīng)液，拍板時(shí)注意不要讓不同孔的液體交叉污染。

    二、手工洗滌操作步驟

    棄去孔內(nèi)反應(yīng)液后，每孔加滿稀釋后的洗滌液（96孔板每孔約300-350μL），靜置浸泡30秒-1分鐘（不要讓孔干涸，也不要浸泡超過5分鐘）。

    倒出洗滌液，在干凈吸水紙上用力拍干孔內(nèi)殘留液體，重復(fù)此操作至說明書要求的洗滌次數(shù)（通常為3-5次，加酶后洗滌多為4-5次）。

    最后一次洗滌完成后，必須拍干，避免殘留洗滌液稀釋后續(xù)試劑，導(dǎo)致顯色偏淺。

    手工洗滌注意事項(xiàng)：

    加洗滌液時(shí)不要溢出孔外，避免交叉污染；

    拍板力度要均勻，避免孔條變形，防止液體殘留。

    三、自動(dòng)洗板機(jī)洗滌操作步驟

    提前檢查洗板機(jī)管路通暢，用蒸餾水沖洗管路后，排空殘留水分；

    設(shè)置每孔洗滌液注入量：本生96孔板每孔250-300μL，浸泡時(shí)間30秒，洗滌次數(shù)按說明書設(shè)置；

    啟動(dòng)洗板程序，完成后取出酶標(biāo)板，在吸水紙上輕拍去除殘留液體，即可進(jìn)行下一步操作。

    洗板機(jī)洗滌注意事項(xiàng)：

    定期清理洗板機(jī)針頭，避免堵塞導(dǎo)致個(gè)別孔洗滌不充分；

    調(diào)整針頭高度，避免針頭刮壞包被抗體的孔底，導(dǎo)致結(jié)果異常。

    四、關(guān)鍵操作要點(diǎn)

    洗滌次數(shù)嚴(yán)格按說明書要求：次數(shù)不夠會(huì)導(dǎo)致未結(jié)合的酶標(biāo)抗體殘留，背景偏高、假陽性；次數(shù)過多會(huì)洗脫已結(jié)合的抗原抗體復(fù)合物，導(dǎo)致信號偏低、靈敏度下降。

    全程不要讓本生酶標(biāo)板干涸：洗滌間隙保持孔內(nèi)有液體，干涸會(huì)導(dǎo)致包被蛋白變性，出現(xiàn)花板、結(jié)果不均。

    拍板要凈：尤其是手工洗滌，殘留液體過多會(huì)稀釋顯色液，導(dǎo)致顯色強(qiáng)度偏低，影響標(biāo)準(zhǔn)曲線線性。

    注：以上科研產(chǎn)品資料供參考，具體可咨詢技術(shù)老師!

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