Elisa實驗: 血清樣本的采集與保存
一、血清樣本采集方法
用無熱原、無內毒素的采血管收集靜脈血,推薦采血量3~5mL,滿足常規(guī)檢測需求。
室溫靜置30~45min讓血液自然凝固,也可4℃放置過夜處理。
以1000~2000×g的轉速離心10~20min,小心吸取上層清亮血清,避免吸入血細胞層造成溶血。
二、血清樣本保存條件
24h內可完成檢測的樣本,可暫存于2~8℃環(huán)境。
需1周內檢測的樣本,2~8℃密封存放即可;超過1周檢測的樣本,分裝后置于≤-20℃環(huán)境凍存。
長期保存建議分裝后放入-80℃冰箱,可穩(wěn)定存放6個月以上。
三、注意事項
全程避免樣本溶血,溶血釋放的過氧化物酶類物質會造成非特異性顯色,干擾結果。
嚴格避免細菌污染,菌體自帶的內源性HRP會引發(fā)假陽性。
必須小體積分裝凍存,?禁止反復凍融?,反復凍融的機械剪切力會破壞蛋白活性,導致假陰性結果。
凍存樣本解凍后輕柔顛倒混勻,不要劇烈渦旋,出現(xiàn)沉淀需再次離心澄清后再檢測。
樣本制備概述
血清樣本收集
血漿樣本收集
細胞裂解液制備
細胞裂解液收集
釋放樣本
理薪收集
類別樣本
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