小鼠短鏈脂肪酸ELISA試劑盒檢測(cè)原理
小鼠短鏈脂肪酸ELISA試劑盒的檢測(cè)原理主要分為兩類,主流采用?雙抗體夾心法?,部分產(chǎn)品使用競(jìng)爭(zhēng)性ELISA法:
主流雙抗體夾心法?
酶標(biāo)板預(yù)先包被小鼠短鏈脂肪酸特異性捕獲抗體,加入樣本后,樣本中的SCFA與固相抗體特異性結(jié)合;再加入HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,形成“捕獲抗體-SCFA-HRP檢測(cè)抗體"的三明治結(jié)構(gòu)。洗滌后加入TMB底物,HRP催化其轉(zhuǎn)化為藍(lán)色產(chǎn)物,加入酸性終止液后變?yōu)辄S色,顏色深淺與樣本中SCFA含量呈正相關(guān),在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定OD值,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線即可計(jì)算出樣本中SCFA的實(shí)際濃度。
部分競(jìng)爭(zhēng)性ELISA法?
利用特異性抗體結(jié)合樣本中的SCFA,通過酶標(biāo)二抗顯色,此時(shí)吸光度(OD值)與SCFA濃度呈負(fù)相關(guān),最終通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算得到目標(biāo)物含量。
注:以上科研產(chǎn)品資料供參考,具體可咨詢技術(shù)老師!
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