產(chǎn)品信息

產(chǎn)品描述

HRbio™ Probe qPCR Mix hUDG 是一款適用于DNA模板(如DNA病毒)的探針法qPCR DNA 聚合酶，以其的定量性被廣泛應(yīng)用，并能有效的防止污染，核心組分Taq HS DNA Polymerase是基于抗體法修飾，經(jīng)過升級改造提升模板親和能力的新一代熱啟動DNA聚合酶。

產(chǎn)品組分

a、內(nèi)含dUTP 及含鎂離子 buffer.    

b、內(nèi)含 AB-HS Taq DNA polymerase

運(yùn)輸與保存方法

-20 ℃,保質(zhì)期1年。

產(chǎn)品特點(diǎn)

1、qPCR反應(yīng)；

2、高特異性和高靈敏度。

體系配制（以50μL反應(yīng)體系為例）

注： 1、引物一般在 0.1μM-1μM 之間進(jìn)行調(diào)整，一般情況下引物濃度在 0.2μM可達(dá)到理想的檢測效果；

2、探針濃度一般在 50nM-250nM 質(zhì)檢進(jìn)行調(diào)整；

3、擴(kuò)增片段的長度一般在 80bp-150bp 之間。

反應(yīng)條件

注：1、預(yù)變性時間設(shè)置：由于本試劑用到的是抗體修飾酶，需要熱激活處理，一般建議預(yù)變性時間設(shè)為 95℃，3min。

• 退火溫度和時間設(shè)置：請根據(jù)引物的 Tm 值和目的基因的長度進(jìn)行調(diào)整。

熱啟動探針法定量PCR Mix

結(jié)果分析

1.擴(kuò)增結(jié)束無擴(kuò)增曲線

1）建議加入高濃度和高質(zhì)量的 DNA 模板確保反轉(zhuǎn)的成功；

2）引物是否降解，可以通過PAGE 膠確定其完整性；

3）反應(yīng)循環(huán)數(shù)不夠，一般將循環(huán)數(shù)設(shè)為 40-45 個循環(huán)；

4）確認(rèn)PCR 程序設(shè)置中是否設(shè)置了熒光采集過程。

2.CT 值出現(xiàn)過晚

1）反應(yīng)條件不夠優(yōu)化，可適當(dāng)降低退火溫度；

2）模板濃度過低或加樣量不足；

3）PCR 產(chǎn)物過長，一般PCR 產(chǎn)物推薦長度為 80-150bp。

3.陰性對照有明顯擴(kuò)增

1）Mix 液、ddH2O、引物和探針可能存在污染，更換新的重新進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

注意事項(xiàng)

本產(chǎn)品僅供科研用途！