人多聚ADP核糖聚合酶1(PARP1)ELISA試劑盒使用說(shuō)明書(shū)

　　BS-1939   人多聚ADP核糖聚合酶1(PARP1)ELISA試劑盒

用雙抗體夾心法，檢測(cè)血清、血漿或組織勻漿中PARP1，檢測(cè)波長(zhǎng)450 nm，保存條件2–8℃，僅限科研使用。

　　- 檢測(cè)原理：預(yù)包被抗-PARP1捕獲抗體 + 生物素化檢測(cè)抗體 + 鏈霉親和素-HRP復(fù)合物 + TMB顯色(藍(lán)→黃，終止后)，OD值與PARP1濃度正相關(guān)。

　　- 樣本類型：人血清、血漿(EDTA/肝素/檸檬酸鈉抗凝)、組織勻漿(PBS pH 7.4)、細(xì)胞裂解液或培養(yǎng)上清;避免含NaN?及溶血/渾濁樣本。

　　- 樣本處理：2000–3000 ×g 離心10–20 min，上清分裝–20℃或–80℃保存(避免反復(fù)凍融);使用前室溫平衡15–30 min。

　　- 典型操作流程：

　　① 標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋(常見(jiàn)范圍 0.78–50 ng/mL 或 100–3200 pg/mL);

　?、?加樣(標(biāo)準(zhǔn)品/樣本 50–100 μL/孔);

　?、?加HRP標(biāo)記檢測(cè)抗體(100 μL/孔)，37℃溫育60 min;

　　④ 洗板(20×濃縮洗滌液稀釋后洗5×);

　　⑤ 顯色(TMB 10–15 min 避光);

　?、?終止(2 M H?SO? 50 μL/孔);

　　⑦ 450 nm讀數(shù)(15 min內(nèi)完成)。

　　- 關(guān)鍵注意事項(xiàng)：嚴(yán)禁混用不同批號(hào)試劑;洗板后勿干孔;底物TMB應(yīng)無(wú)色，變藍(lán)則失效;終止液為稀硫酸;結(jié)果需以同板標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算。

　　- 試劑盒組成(96T示例)：預(yù)包被板、標(biāo)準(zhǔn)品(凍干)、檢測(cè)抗體(生物素化)、SA-HRP、TMB顯色液A/B、終止液、20×洗滌液、樣本/抗體稀釋液;需自備酶標(biāo)儀、精密移液器、37℃孵育箱、蒸餾水。

　　- 有效期：多數(shù)為 6個(gè)月(2–8℃);開(kāi)封后板條密封+4℃保存≤1周。

　　不同品牌的稀釋倍數(shù)、溫育時(shí)間、標(biāo)準(zhǔn)品濃度范圍略有差異，實(shí)際操作必須以所購(gòu)試劑盒內(nèi)附紙質(zhì)說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。若已購(gòu)買但未附說(shuō)明書(shū)，請(qǐng)聯(lián)系供應(yīng)商索取PDF版。(僅“科研用途")。

　　注：以上科研產(chǎn)品資料供參考!

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