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如何保存ELISA樣本以確保準(zhǔn)確性

更新時(shí)間:2026-05-27  |  點(diǎn)擊率:257

  如何保存ELISA樣本以確保準(zhǔn)確性


  要保證ELISA檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確,需遵循「分裝置凍存、控制凍融次數(shù)、規(guī)避污染」的核心保存原則?,不同保存時(shí)長(zhǎng)、不同樣本類型的具體操作規(guī)范如下:

  一、通用保存核心規(guī)則

  按單次用量分裝?:根據(jù)每次檢測(cè)所需樣本量提前分裝,避免后續(xù)反復(fù)凍融導(dǎo)致蛋白降解效價(jià)降低。

  嚴(yán)格控制保存時(shí)長(zhǎng)與溫度?:

  短期保存(≤1周):2~8℃密封冷藏即可,不會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果;

  長(zhǎng)期保存:需分裝后置于-20℃或-80℃凍存,優(yōu)先選擇-80℃,可保存1~6個(gè)月;超過(guò)半年的樣本不建議用于精準(zhǔn)定量檢測(cè)。

  絕對(duì)禁止反復(fù)凍融?:反復(fù)凍融1次就會(huì)導(dǎo)致蛋白濃度降低,凍融次數(shù)≥3次會(huì)直接造成結(jié)果偏差,因此分裝凍存是必須操作。

  溶解后二次離心?:凍存樣本檢測(cè)前需緩慢解凍至室溫,充分混勻后再次離心去除沉淀,取上清進(jìn)行檢測(cè),避免沉淀雜質(zhì)干擾顯色。

  二、不同類型樣本的保存細(xì)節(jié)

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  三、需要注意事項(xiàng)

  血清在冰箱保存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致IgG聚合,引發(fā)間接法ELISA本底加深,因此超過(guò)1周的檢測(cè)一定要凍存,不要冷藏放置。

  保存時(shí)必須嚴(yán)格無(wú)菌操作,長(zhǎng)期保存可添加低濃度防腐劑,但需確認(rèn)防腐劑不會(huì)影響抗原抗體結(jié)合。

  抗凝不凈的樣本會(huì)因纖維蛋白原干擾出現(xiàn)假陽(yáng)性,若采集后不能及時(shí)離心,需4℃放置不超過(guò)2天,避免纖維蛋白析出干擾結(jié)果。

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